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腺病毒
來(lái)源：萬(wàn)物生物 發(fā)布時(shí)間：2021-11-01
腺病毒是一類(lèi)中等大小、無(wú)包膜的雙鏈DNA病毒，已知可導(dǎo)致人類(lèi)輕度至重度呼吸道疾病。腺病毒在研究中的優(yōu)勢(shì)包括它們的大包裝容量(>8 kb)、高滴度和高水平的轉(zhuǎn)基因表達(dá)。此外，這些病毒能夠以幾乎100%的效率靶向廣泛的分裂和非分裂細(xì)胞類(lèi)型。不像慢病毒某人逆轉(zhuǎn)錄酶病毒，腺病毒不會(huì)整合到宿主基因組中。腺病毒的缺點(diǎn)包括短暫的轉(zhuǎn)基因表達(dá)，以及由病毒衣殼誘導(dǎo)的實(shí)質(zhì)性免疫反應(yīng)。
腺病毒可以通過(guò)幾種方法產(chǎn)生，其中最常見(jiàn)的涉及腺病毒質(zhì)粒在哺乳動(dòng)物細(xì)胞或微生物(包括細(xì)菌和酵母)中的同源重組。兩個(gè)質(zhì)粒，稱(chēng)為穿梭質(zhì)粒和腺病毒(也稱(chēng)為骨架)質(zhì)粒，被重組到一個(gè)包含兩個(gè)質(zhì)粒序列的DNA分子中。然后可以將這種DNA分子轉(zhuǎn)染到哺乳動(dòng)物包裝細(xì)胞系中，產(chǎn)生腺病毒顆粒。。
腺病毒成分
腺病毒基因組是一個(gè)線(xiàn)性的36Kb雙鏈DNA (dsDNA)分子，包含多個(gè)重剪接轉(zhuǎn)錄物?；蚪M的兩端是我已轉(zhuǎn)換terminal repeats (ITRs)。基因分為早期(E1-4)和晚期(L1-5)轉(zhuǎn)錄本。有57種可接受的人腺病毒類(lèi)型，大多數(shù)腺病毒載體基于Ad5?；?/span>Ad5的載體使用柯薩奇-腺病毒受體(CAR)進(jìn)入細(xì)胞。
重組腺病毒刪除了兩個(gè)基因:E1和E3。E1由腺病毒包裝線(xiàn)293或911；它從病毒載體中的缺失使病毒復(fù)制能力下降。E3參與逃避宿主免疫，并不是病毒產(chǎn)生的關(guān)鍵。這兩個(gè)成分的缺失導(dǎo)致轉(zhuǎn)基因包裝容量為>8 Kb。構(gòu)建體包含左右臂，以促進(jìn)轉(zhuǎn)基因同源重組到腺病毒質(zhì)粒中。