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16S/ITS分型
來源：萬物生物 發(fā)布時間：2021-11-02
16S /ITS菌種鑒定
通過DNA 測序?qū)ξ⑸镞M行物種鑒定（菌種鑒定）是比傳統(tǒng)生化鑒定更先進的鑒定方法。DNA 測序不依賴菌種本身特點，對所有菌種均可使用。比傳統(tǒng)生化鑒定更加快速，準確。萬物生物提供的微生物物種鑒定服務包括細菌16s rDNA鑒定和真菌26s rDNA鑒定、真菌ITS和真菌18s 鑒定。
提供樣品
基因組DNA：濃度≥ 10 ng/μl，總體積≥ 20 μl，革蘭氏陽性細菌由于細胞壁較厚，最好提供基因組DNA；
帶有單菌落的平板或斜面：應長有至少分離三次以上的單菌落。
交付報告
PCR 產(chǎn)物照片；
菌種鑒定NCBI 參考結(jié)果；
測序彩色波形圖；
測序方向圖；
序列堿基圖。
16S DNA測序技術服務
技術原理
16S rDNA為編碼原核生物核糖體小亞基rRNA的DNA序列，具有10個保守區(qū)和9個高變區(qū)，其中保守區(qū)在細菌間差異不大，高變區(qū)具有屬或種的特異性，隨親緣關系不同而存在差異。16S rDNA擴增子測序，通常是選擇1-2個高變區(qū)，利用保守區(qū)設計通用引物進行PCR擴增，再對高變區(qū)進行測序分析和菌種鑒定。16S rDNA擴增子測序技術是研究環(huán)境樣品中微生物群落結(jié)構(gòu)組成、挖掘樣品之間差異的重要手段。
16S rDNA結(jié)構(gòu)示意圖
16S rDNA常用引物
實驗路線
為提高數(shù)據(jù)的利用效率，擴增子通常進行混樣建庫，為此需要在上下游引物的5’端加6-8個堿基的barcode序列，用于區(qū)分不同的樣品；PCR產(chǎn)物檢測合格后，等質(zhì)量混合到一起，構(gòu)建PCR-free文庫并上機測序。
技術路線
樣本要求
注：擴增子測序結(jié)果的準確性受DNA質(zhì)量影響較大，所以前期樣本采集的過程一定要保證快速和低溫環(huán)境，提取過程也要確保DNA的完整性和提取量。
實驗周期
樣本質(zhì)檢合格后，22個工作日。
【一站式整體科研服務，成就更高水平的科研成果】
標書基金實驗咨詢 表觀遺傳組學分析
課題實驗結(jié)題指導 細胞分子功能驗證
實驗培訓文章潤色 動物模型裸鼠成瘤
臨床檢測科研轉(zhuǎn)化 病理染色分子互作