Hoechst 33342染色液（1 mg/mL）

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貨號：

KB210538

產(chǎn)品規(guī)格：

1ml

品牌：

萬物

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產(chǎn)品詳情操作說明注意事項

產(chǎn)品簡介

Hoechst 33342（bisBenzimide H 33342，HOE 33342）分子式為C₂₇H₂₈N₆O·3HCl，分子量為561.93，CAS編號為23491-52-3，是一種可以穿透細胞膜對細胞核內(nèi)DNA染色的藍色熒光染料；該染色液在溶液中熒光較弱，但在AT序列富集區(qū)域的DNA小溝處與之結(jié)合后熒光增強，因此被用于細胞核染色，或者常規(guī)DNA染色。

本產(chǎn)品為溶液形式，Hoechst 33342濃度為1 mg/mL，用于染色時，常用工作濃度推薦0.5-10 μg/mL。Hoechst 33342最大激發(fā)波長為346 nm，最大發(fā)射波長為460 nm；在與雙鏈DNA結(jié)合后，最大激發(fā)波長為350 nm，最大發(fā)射波長為461 nm；可用于固定或非固定的細胞或組織的細胞核標記，并可通過熒光顯微鏡或流式細胞儀等儀器檢測。

儲存與運輸

冰袋（wet ice）運輸；

-20℃避光保存，12個月有效。

操作步驟

1. 將Hoechst 33342染色液（1 mg/mL）用PBS或其他合適的緩沖液稀釋成0.5-10 μg/mL Hoechst 33342染色工作液；

2. 對于固定的細胞或者組織切片：

a. 對于固定的細胞或組織樣品，固定后去除固定液，使用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min（如檢測懸浮細胞，請按懸浮細胞常規(guī)操作方式進行，實驗均需添加離心等步驟）；

b. （可選步驟）如需對固定的細胞或者組織進行免疫熒光染色等處理，則優(yōu)先進行相關(guān)處理，處理后再進行Hoechst 33342染色；

c. 取適量的Hoechst 33342染色工作液對固定的細胞或者組織進行染色，覆蓋樣品并室溫孵育5 min左右；

d. 去除Hoechst 33342染色工作液后，用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min；

e. 封片后或者直接置于熒光顯微鏡下觀察，激發(fā)波長為350 nm，發(fā)射波長為460 nm。

3. 對于活細胞或者培養(yǎng)組織：

a. 細胞培養(yǎng)物中加入適量Hoechst 33342染色工作液，約1/10細胞培養(yǎng)基體積，須充分覆蓋待染色的樣品；通常六孔板一個孔中需加入1 mL染色液，96孔板一個孔中需加入100 μL染色液；于37℃培養(yǎng)箱中，孵育10-20 min；

b. 去除Hoechst 33342染色工作液后，用PBS或者其他合適的緩沖液洗滌2-3次，每次3-5 min；

c. 直接于熒光顯微鏡下觀察，激發(fā)波長為350 nm，發(fā)射波長為460 nm。

注意事項

1. Hoechst 33342染色工作液孵育的濃度和時間，可根據(jù)實際情況進行調(diào)整。

2. 熒光染料存在淬滅的問題，染色后盡量當日完成檢測，可用抗熒光淬滅封片劑減緩熒光猝滅。

3. 操作時請穿實驗服，配戴一次性手套。

本產(chǎn)品僅供科研用途，不用于臨床診斷！

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